牛病毒腹瀉抗體檢測(cè)卡由預(yù)包被牛病毒性腹瀉抗原的酶標(biāo)板、酶標(biāo)記物及其他配套試劑組成，應(yīng)用酶聯(lián)免疫法(ELISA)原理檢測(cè)牛血清、血漿樣本中牛病毒性腹瀉抗體。實(shí)驗(yàn)時(shí)在酶標(biāo)板中加入對(duì)照血清和待檢樣本，經(jīng)溫育后若樣品中含有病毒性腹瀉抗體，則將與酶標(biāo)板上抗原結(jié)合，經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的其他成分后;再加入酶標(biāo)記物，與酶標(biāo)板上抗原抗體復(fù)合物發(fā)生特異性結(jié)合;再經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的酶標(biāo)記物，在孔中加TMB底物液，與酶標(biāo)結(jié)合物反應(yīng)形成藍(lán)色產(chǎn)物，顯色深淺與樣品中的特異性抗體含量成正相關(guān);加入終止液終止反應(yīng)后，產(chǎn)物變?yōu)辄S色;用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)測(cè)定各反應(yīng)孔中的吸光值，即可知樣品是否含有牛病毒性腹瀉抗體。

　　牛病毒腹瀉抗體檢測(cè)卡用法與判定：

　　1.1樣本處理

　　1.1.1 血清：在室溫下血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分），仔細(xì)收集上清，如保存過(guò)程中有沉淀，請(qǐng)?jiān)俅坞x心。

　　1.1.2 血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA，檸檬酸鈉或者肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，再離心20分鐘（2000-3000轉(zhuǎn)/分），仔細(xì)收集上清，如保存過(guò)程中有沉淀，請(qǐng)?jiān)俅坞x心。

　　1.2 操作步驟 將密封的檢測(cè)卡從鋁箔袋中取出，置于干燥平整的桌面上，用吸管吸取適量血清或血漿，緩慢滴加1滴到加樣孔中（約40μL），再滴入2~3滴樣本處理液（約80μL~120μL)，并開(kāi)始計(jì)時(shí)。加樣完成后10～15分鐘觀察結(jié)果。